斑节对虾细胞周期蛋白Y基因克隆与原核表达

• 作者: 傅明骏 周发林 李伟杰 杨其彬 江世贵 赵超 邱丽华 郭松
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 斑节对虾 cyclin Y基因 分子克隆 实时荧光定量PCR 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 896-907
• 页数: 12页
• 分类号: S917
• 字数: 7596字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2015.14481

摘要

为了研究细胞周期蛋白Y(cyclin Y)在斑节对虾(Penaeus monodon)卵巢发育中的作用,从斑节对虾转录组数据中筛选获得cyclin Y基因部分序列,采用SMART-RACE方法克隆得到斑节对虾细胞周期蛋白Y (Pm-cyclin Y)基因cDNA全序列。Pm-cyclin Y基因cDNA全长1576 bp,其中包含108 bp的5′非编码区(5′UTR)和439 bp的3′非编码区(3′UTR)以及1029 bp的开放阅读框(ORF),可编码342个氨基酸。生物信息学分析显示,其编码的氨基酸序列有1个保守的周期蛋白框(cyclin box)同源结构域(172~257 aa),预测的分子量约为37.6 kD,理论等电点6.64。实时定量 PCR 显示其 mRNA 在卵巢的表达量显著高于其他组织(P<0.05)；并且在卵巢5个不同发育期都有表达,在III期卵巢中的表达量最高。本研究通过原核表达方法对Pm-cyclin Y进行重组表达,为其蛋白质功能方面的研究奠定了基础。