抗非洲猪瘟病毒VP73蛋白鸡卵黄抗体的制备及鉴定

• 作者: 刘建利 宗卉 张彩虹 曹琛福 曾少灵 杨俊兴 祝贺 陶虹 高又文
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 VP73蛋白 卵黄抗体
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 821-825
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.1
• 语种: 中文

摘要

为研制非洲猪瘟的诊断试剂,将原核表达的非洲猪瘟病毒VP73融合蛋白纯化后,作为抗原免疫蛋鸡,先后用饱和硫酸铵和硫酸钠对卵黄抗体(IgY抗体)进行分离提取,制备抗非洲猪瘟病毒VP73蛋白的特异性IgY抗体.对初步提纯的IgY抗体进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定,并用间接ELISA测定IgY抗体的效价.结果显示,提纯后的IgY抗体有1条重链和1条轻链,分子质量分别约为65 ku和26 ku;IgY抗体可与非洲猪瘟病毒VP73蛋白发生特异性反应,在约71 ku处出现特异性杂交条带;间接ELISA测定的IgY抗体效价约为1∶8 192;浓度测定结果显示,每1 mL卵黄液可得到9.2mg卵黄抗体.结果表明,用表达的VP73蛋白作为免疫原制备的特异性IgY抗体具有免疫反应原性,可用于研制非洲猪瘟的诊断试剂.