人VIGILIN基因分段克隆及表达

• 作者: 俞小琴 刘秋英 覃扬 赵荣策 魏玲 黄元
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: VIGILIN基因 结构域 分段克隆 原核表达系统
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 661-666
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨入高密度脂蛋白结合蛋白(HDLBP)-VIGILIN蛋白与其他蛋白质相互作用的机制.方法 根据VIGILIN基因全长编码区的结构域,将VIGILIN基因全长编码区分为N端、KH1-7、KH8-12、KH13-14、C端5段,以pDsred2-N1/VIGILIN为模板分别扩增5个片段及全长cDNA后克隆至pGEX 5X 3原核表达载体,测序,然后将鉴定后的重组质粒转化到表达宿主菌E.coli BL21中进行诱导表达GST-VIGILIN融合蛋白,并用SDS-PAGE电泳及Western blot检测蛋白表达结果.结果 成功扩增了人VIGILIN基因编码区分段片段,并且构建到原核表达载体中,经酶切、测序鉴定证实序列完全正确,重组载体构建成功,并且在pGEX原核表达系统中诱导表达GST-VIGILIN融合蛋白,经SDS-PAGE电泳及Western blot检测初步证实表达成功.结论 本实验首次根据VIGILIN蛋白不同的结构域成功构建了GST-VIGILIN分段克隆原核表达载体,并且对融合蛋白表达条件进行了优化,成功表达了GST融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	覃扬	四川大学华西基础医学与法医学院	27	139	7.0	10.0
2	魏玲	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室	19	69	3.0	7.0
3	俞小琴	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室	3	0	0.0	0.0
4	刘秋英	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室	2	1	1.0	1.0
5	黄元	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室	1	0	0.0	0.0
6	赵荣策	四川大学华西医院肝血管外科	2	0	0.0	0.0