恒河猴 P21基因在 COS－7细胞中沉默位点的验证

• 作者: 刘云波 张晨 李雨函 石亮 苏静芬
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 基因沉默 P21基因 恒河猴
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 297-300
• 页数: 4页
• 分类号: R743.31|Q95-33
• 字数: 2582字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2015.03.014

摘要

目的：在细胞水平筛选恒河猴 P21基因的有效沉默靶点。方法检测 COS－7中 P21基因的表达水平；设计shRNA并构建P21－RNA干扰慢病毒载体FUGW－TDT－P21shRNA转染COS－7细胞，通过real－time PCR检测沉默效率，并以Western blot 在蛋白水平进行验证。结果筛选到四个有效的靶位，分别位于P21 mRNA的541－561、542－562、215－239、624－648 bp。四个靶位点在 mRNA 水平的沉默效率分别为（91．82±3．21）％、（82．47±2．48）％、（81．31±2．69）％和（87．35±4．59）％。相应的蛋白表达量为（11．97±0．70）％、（20．22±0．65）％、（23．21±0．63）％和（14．42±0．86）％。结论在细胞水平筛选得到四个有效的P21基因沉默靶点，可用于恒河猴基因沉默研究。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘云波	中国医学科学院医学实验动物研究所	45	391	9.0	19.0
2	张晨	北京大学生命科学学院	34	56	4.0	7.0
3	李雨函	中国医学科学院医学实验动物研究所	4	17	3.0	4.0
4	苏静芬	中国医学科学院医学实验动物研究所	3	6	2.0	2.0
5	石亮	中国医学科学院医学实验动物研究所	3	8	2.0	2.0