肺炎链球菌SPD1672蛋白EL4功能环的原核表达及多克隆抗血清制备

• 作者: 朱杰华 杨昌伟 闵迅 骆诗露 黄健 黄美容
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎链球菌 SPD1672蛋白EL4功能环 原核表达 多克隆抗血清
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 249-252
• 页数: 4页
• 分类号: R446
• 字数: 3168字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2015.04.03

摘要

目的 原核表达肺炎链球菌SPD1672蛋白膜外EL4功能环,制备并鉴定其多克隆抗血清.方法 生物信息学分析SPD1672蛋白结构功能区,用pCold TF质粒构建含EL4功能环的原核表达载体,IPTG诱导蛋白质表达后行镍柱纯化.经HRV 3C蛋白酶酶切、鉴定后,免疫新西兰大白兔以制备多克隆抗血清,间接ELISA鉴定效价,western blot鉴定抗血清与肺炎链球菌D39菌株天然蛋白质的亲合力.结果 EL4环可能为SPD1672蛋白酶活性中心.成功构建pCold TF-SPD1672EL4原核表达载体,诱导表达后获得纯度大于95％的重组融合目的蛋白质.该蛋白质免疫新西兰大白兔后获得效价达到5.12×106的多克隆抗血清,此抗血清与重组的SPD1672EL4蛋白及肺炎链球菌中天然SPD1672蛋白有较好的亲合力.结论 成功获得高纯度的肺炎链球菌SPD1672EL4蛋白及其特异的多克隆抗血清,为进一步对SPD1672蛋白的结构与功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闵迅	遵义医学院附属医院医学检验科	39	93	5.0	8.0
2	杨昌伟	遵义医学院附属医院核医学科	25	60	5.0	6.0
3	黄健	遵义医学院附属医院医学检验科	21	35	4.0	5.0
4	黄美容	遵义医学院附属医院输血科	16	57	4.0	7.0
5	朱杰华	遵义医学院附属医院医学检验科	16	28	3.0	4.0
6	骆诗露	遵义医学院附属医院医学检验科	11	12	2.0	3.0