猪链球菌2型c-di-AMP水解蛋白基因gdpP的表达与活性分析

• 作者: 孙建和 杜斌
• 来源期刊: 上海交通大学学报（农业科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 环二腺苷酸 GdpP 水解酶活性 猪链球菌2型
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 页码范围: 34-39
• 页数: 6页
• 分类号: S852.61
• 字数: 3704字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.1671-9964.2015.05.007

摘要

为研究猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)环二腺苷酸(c-di-AMP)水解蛋白GdpP的生化特性,根据已公布的SS2中国强致病株98HAH33全基因组中的gdpP序列信息设计引物,以SS2强致病株HA9801基因组为模板,通过PCR方法克隆获得了SS2的c-di-AMP水解蛋白基因gdpP完整序列,其阅读框由1965个核苷酸组成,编码654个氨基酸.应用大肠杆菌重组表达系统,表达、纯化了GdpP,进而分析了其体外生物活性,结果显示纯化的重组蛋白可以在体外水解c-di-AMP形成pApA.其水解酶活性在碱性环境条件下(pH 8.0)相对较强,而在酸性环境下(pH 6.0,6.5)未检测到活性;同时,水解酶活性还依赖于二价金属离子Mg2+、Mn2+以及Co2+的存在,且在Mn2+存在的条件下相对活性最强,而在Ca2+、Fe2+和Cu2+存在的条件下则均未表现出活性.上述结果为进一步深入研究c-di-AMP在猪链球菌2型中发挥的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙建和	上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室	70	449	10.0	17.0
2	杜斌	上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室	8	28	3.0	5.0