重排NAD+合成途径提高磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性

• 作者: 李会玉 润顺琪 田平芳
• 来源期刊: 北京化工大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌 NAD+ 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 琥珀酸 富马酸
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 生物技术与环境工程
• 页码范围: 68-72
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

为提高磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的催化活性,构建了两个载体分别表达:(1)磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC);(2)与NAD+合成相关的关键酶,包括烟酸转磷酸核糖激酶(pncB)、烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶(nadD)和NAD+合成酶(nadE).将这两个载体共转化大肠杆菌,获得重组菌E.coli(pET-pepc&pUC-pncB-nadD-nadE).聚丙烯酰胺凝胶电泳显示这些酶均实现了高表达.摇瓶发酵显示,与单独过表达PEPC的重组菌相比,双质粒工程菌的PEPC酶活提高了4.36倍;与野生型大肠杆菌相比,双质粒工程菌的琥珀酸产量提高了4.23倍,达到0.9g/L,富马酸产量提高了5.23倍,达到5.4 mg/L.上述结果表明加强NAD+合成途径提高了PEPC活性,并增加了还原三羧酸循环的代谢流量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田平芳		66	262	9.0	13.0
2	润顺琪		1	0	0.0	0.0
3	李会玉		2	1	1.0	1.0