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摘要:
干扰( RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。本研究以稻纵卷叶螟可溶型海藻糖酶基因( CmTre1)为靶标,设计RNAi靶位点并将其命名为CmTre1?,在其两端分别添加BamH I与Spe I酶切位点并进行人工合成,然后经双酶切后与p1301植物表达载体连接,构建重组表达载体p1301-CmTre1?。 PCR、双酶切和测序鉴定结果证明重组表达载体p1301-CmTre1?构建成功,并将其成功转入农杆菌LBA4404,构建基因工程菌。用含有p1301-CmTre1?质粒的农杆菌LBA4404浸染中花11号水稻的愈伤组织,经过愈伤组织的抗性筛选、分化和植株再生,获得26株阳性转基因植株。用取食非转基因水稻的稻纵卷叶螟作为对照,用实时荧光定量 PCR 方法分株测定取食转基因水稻稻纵卷叶螟体内CmTre1基因的mRNA表达水平,并检测其体内海藻糖酶活性变化。结果显示,相较于对照组,取食转基因水稻稻纵卷叶螟体内CmTre1基因表达量下降了44.79%,海藻糖酶活力平均下降了14.94%。研究结果表明转基因水稻的RNA干扰效应相当明显,能对取食其叶片的稻纵卷叶螟CmTre1基因起到明显的沉默作用。
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内容分析
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文献信息
篇名 重组RNA干扰表达载体的构建与鉴定
来源期刊 山地农业生物学报 学科 生物学
关键词 RNA干扰 稻纵卷叶螟 海藻糖酶基因 表达载体构建
年,卷(期) 2015,(3) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 48-54
页数 7页 分类号 Q784
字数 4434字 语种 中文
DOI 10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2015.03.009
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 杜娟 贵州大学昆虫研究所贵州山地农业病虫害重点实验室 31 157 7.0 11.0
2 李尚伟 贵州大学昆虫研究所贵州山地农业病虫害重点实验室 24 169 8.0 12.0
3 田宇 贵州大学昆虫研究所贵州山地农业病虫害重点实验室 14 28 3.0 4.0
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研究主题发展历程
节点文献
RNA干扰
稻纵卷叶螟
海藻糖酶基因
表达载体构建
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
山地农业生物学报
双月刊
1008-0457
52-5013/S
大16开
贵阳花溪 贵州大学
66-66
1982
chi
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