禽坦布苏病毒NS1-ELISA的初步建立

• 作者: 万春和 傅光华 傅秋玲 施少华 潘异哲 程龙飞 陈珍 陈红梅 陈翠腾
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽坦布苏病毒 非结构蛋白NS1 表达 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 1027-1031
• 页数: 5页
• 分类号: S852
• 字数: 3442字
• 语种: 中文

摘要

对禽坦布苏病毒非结构蛋白NS1基因进行原核表达,并进行生物学活性鉴定.将表达成功具有生物学活性的重组蛋白经纯化后,作为抗原包被ELISA平板,通过条件优化,建立检测禽坦布苏病毒血清学检测方法.结果表明,表达的NS1重组蛋白大小约为60 kd,该蛋白经Western blot检测具有良好的生物学活性.将该重组蛋白纯化后包被ELISA板建立检测禽坦布苏病毒血清学间接ELISA方法,该方法优化后的参数为2.5μg·mL-1包被ELISA板;一抗(鸭血清)血清稀释度为1∶100;酶标二抗为1∶3 000.本研究建立的方法特异性强,批内和批间重复性较好.用建立的间接ELISA方法对坦布苏病毒灭活苗免疫鸭血清和自然感染鸭血清进行检测,结果表明,本研究建立的NS1-ELISA不能用于区分禽坦布苏自然感染和疫苗免疫血清的鉴别诊断.