人纤溶酶原丝氨酸蛋白酶( SP )活性区基因的克隆、表达与功能研究

• 作者: 万翠香 崔佳
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人纤溶酶原 丝氨酸蛋白酶(SP) 活性区 μplg 质粒构建
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 982-985
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2787字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2015.10.008

摘要

目的 克隆和表达人纤溶酶原( plasminogen,Plg)的丝氨酸蛋白酶( SP)活性区基因μplg,并进行重组蛋白的纯化及功能探索. 方法 用PCR方法从pDNR-plg质粒上扩增μplg,构建原核表达载体pET22b(+)-μplg,IPTG诱导重组蛋白表达后复性,再经Ni+-NTA树脂亲和层析纯化,通过与双歧杆菌外膜蛋白Serpin的共孵育实验来探索μPlg的功能. 结果 PCR成功扩增出了680 bp的人纤溶酶原Plg的SP区基因μplg,测序正确后与表达载体pET22b(+)重组,重组质粒pET22b(+)-μplg在大肠杆菌BL21中成功表达出分子量约为35 kD的μPlg蛋白质,经纯化后的蛋白纯度高达约90%以上,与Serpin蛋白共孵育后得到了二者的复合物. 结论 人纤溶酶原μPlg的成功克隆、表达及纯化对于研究SP区功能和与双歧杆菌的黏附作用有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	万翠香	南昌大学食品科学与技术国家重点实验室	21	103	6.0	9.0
2	崔佳	长治医学院微生物学教研室	9	19	2.0	4.0