Am80和TSA对鸡Stra8基因启动子活性的调控作用

• 作者: 刘志永 左其生 张振韬 朱睿 王怡临 肖天荣 蒋舒颖 陈庭峰 韦光辉
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: Stra8基因 启动子活性 调控元件 Am80 TSA
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 896-902
• 页数: 7页
• 分类号: S831|S813.3
• 字数: 4651字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.06.004

摘要

旨在确定鸡Stra8基因启动子的主要调控区域,预测调控元件结合位点,探索用他米巴洛丁(Am80)或曲古抑菌素(TSA)诱导对Stra8启动子活性的调控作用.将鸡Stra8基因5 '侧翼系列缺失片段插入到pGL3-basic载体构建重组质粒,并转染DF-1和GC-1,通过检测荧光素酶活性和预测启动子区域调控元件的结合位点,选取合适的启动子片段并构建其重组质粒Stra8-EGFP;将Am80和TSA分别按一定的浓度梯度诱导转染细胞,进行荧光素酶活性检测以筛选最佳诱导浓度;用最适剂量的Am80和TSA分别单独或联合诱导转染重组质粒Stra8-EGFP的P19,并检测各诱导组的绿色荧光表达程度.结果表明,鸡Stra8基因启动子-1 055～+54bp片段的活性较强,且含有RARα、RXRα和RARβ的结合位点;分别单独或联合使用Am80和TSA对转染的细胞进行诱导,结果显示,Am80和TSA协同作用的荧光素酶活性最高;重组质粒Stra8-EGFP转染细胞后,用Am80 (10-5 mol·L-1)和TSA(10-6 mol·L-1)联合诱导可见绿色荧光强度最强.本研究成功分析了鸡Stra8基因启动子的活性和调控元件的结合位点,确定Am80和TSA共同诱导可显著提高Stra8基因启动子调控活性.