甜高粱琥珀酸半醛脱氢酶SbSSADH基因克隆及原核表达

• 作者: 朱莉 杨泽伟 王龙海 郎志宏 黄大昉
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 甜高粱 SSADH 蛋白表达 酶活测定
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 83-90
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.013

摘要

γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)代谢旁路是TCA循环的一个代谢支路,广泛存在于动植物和微生物中,植物GABA代谢旁路与植物生物和非生物胁迫响应相关.琥珀酸半醛脱氢酶(SSADH)是GABA旁路的一个关键酶,对GABA途径在生物体内发挥功能起着至关重要的作用.通过检索MaizeGDB和Gramene数据库获得甜高粱SbSSADH基因信息,利用同源克隆的方法获得了甜高梁SbSSADH基因.序列分析结果表明,SbSSADH基因与玉米、甘蔗在核酸序列的相似度为94.77％,但前端约200 bp的信号肽部分差异较大.通过以pET-28a为表达载体构建SbSSADH原核表达系统,Rosetta菌株为表达菌,表达出约50 kD的SSADH蛋白,将纯化的蛋白进行酶活分析,纯化蛋白具有琥珀酸半醛脱氢酶活性,并且受酶抑制剂ATP和AMP的抑制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄大昉	中国农业科学院生物技术研究所	96	1673	22.0	38.0
2	郎志宏	中国农业科学院生物技术研究所	37	472	14.0	21.0
3	朱莉	中国农业科学院生物技术研究所	25	286	8.0	16.0
4	杨泽伟	西南科技大学生命科学与工程学院	3	28	2.0	3.0
8	王龙海	西南科技大学生命科学与工程学院	3	28	2.0	3.0