含Ⅲ型纤连蛋白域蛋白5真核表达载体的构建及初步功能研究

• 作者: 周蕾 成燕 李进 肖俊杰 魏飞宇
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: FNDC5基因 真核表达载体 质粒构建 线粒体 能量 小鼠
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 19-24,37
• 分类号: R3
• 字数: 3383字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16118/j.1008-0392.2015.04.004

摘要

目的 构建含小鼠FNDC5基因的绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-FNDC5,并初步探索其对C2C12肌细胞的线粒体能量代谢的影响.方法 应用反转录-聚合酶链反应法从小鼠腓肠肌和心脏组织中扩增出两端带有HindⅢ和EcoR Ⅰ酶切位点的FNDC5编码片段,经回收、纯化酶切后,依次连接到质粒PMD19-T和pEGFP-C3上,获得过表达载体后转染至C2C12肌细胞,48 h后以激光共聚焦显微镜拍摄线粒体荧光强度,以荧光定量PCR检测与线粒体能量代谢相关的基因PGC-1β、ATPase6、ND1和ND6的表达情况.结果 PCR及测序结果表明:重组质粒pEGFP-C3含有FNDC5段,方向及大小正确,过表达FNDC5可以增强线粒体荧光强度,并增加线粒体能量代谢相关的基因PGC-1β、ATPase6、ND1和ND6的表达.结论 成功构建了小鼠真核表达载体pEGFP-C3-FNDC5,过表达FNDC5可以增强线粒体能量代谢.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周蕾	南京医科大学第一附属医院心脏内科	65	297	10.0	13.0
2	成燕	同济大学附属同济医院心身科	10	70	5.0	8.0
3	魏飞宇	南京医科大学第一附属医院心脏内科	1	2	1.0	1.0
4	李进	上海大学生命科学学院	2	2	1.0	1.0
5	肖俊杰	上海大学生命科学学院	10	17	2.0	4.0