粉红粘帚菌几丁质酶基因cDNA克隆及表达

• 作者: 于秋 伍淼 杨俊颖 王傲雪 王婷婷 王沛文 王窦逗
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 粉红粘帚菌 几丁质酶 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 9-14
• 页数: 6页
• 分类号: S482.292
• 字数: 4361字
• 语种: 中文

摘要

为研究粉红粘帚菌(Clonostachys rosea)生防机制并获得生物防治相关基因,文章利用RT-PCR方法克隆粉红粘帚菌1个几丁质酶基因T-ech42,对该基因进行生物信息学分析,并在大肠杆菌原核表达系统中进行外源表达.该基因长度为1 263 bp,编码420个氨基酸.推导T-ech42氨基酸序列以及蛋白质结构的生物信息学分析表明,该蛋白等电点为5.85,理论分子质量为45.13 ku,N端含信号肽,长度为20个氨基酸;T-ech42属于糖基水解酶18家族内切几丁质酶,包含SIGGW底物结合位点和FDGIDXDWE活性位点.将该基因构建到原核表达载体pET-22b(+)上,转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,经终浓度1 mmol· L-1的IPTG诱导4h后,可见酶蛋白活性表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王傲雪	东北农业大学生命科学学院	79	525	12.0	18.0
5	伍淼	东北农业大学园艺学院	3	6	1.0	2.0
6	王婷婷	东北农业大学园艺学院	17	69	6.0	8.0
7	杨俊颖	东北农业大学生命科学学院	3	6	1.0	2.0
8	王窦逗	东北农业大学生命科学学院	3	3	1.0	1.0
9	王沛文	东北农业大学园艺学院	4	16	1.0	4.0
10	于秋	东北农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0