制备脆弱拟杆菌来源的新型α-半乳糖苷酶单抗用于检测通用型红细胞中的微量残留酶

• 作者: 季守平 宫锋 张士坤 张雪 李素波 檀英霞 贠志敏 高红伟
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: α-半乳糖苷酶 单克隆抗体 血型转变 通用型红细胞 残留酶检测
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 302-305
• 页数: 4页
• 分类号: R457.11
• 字数: 3681字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2015.04.016

摘要

目的：建立一种检测微量脆弱拟杆菌（ Bacteroides fragilis）来源的α-半乳糖苷酶的方法用于测定酶解转变的通用型红细胞上的残留酶。方法用脆弱拟杆菌来源的基因重组α-半乳糖苷酶（纯度大于90％）免疫BALB／c小鼠，制备单抗；用稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株制备腹水单抗，再经HiTrap rProtein A柱纯化获得高纯度的抗体；间接ELISA法测定单抗效价，Western 印迹法评价单抗特异性。联合纯化后的单抗和兔多抗采用间接ELISA法检测酶解法制备的通用型红细胞和洗涤液中的残留酶量。结果获得了高效价高纯度的单抗，Western 印迹实验显示该抗体可特异性地与新型α-半乳糖苷酶结合；间接ELISA法检测微量α-半乳糖苷酶的下限为1 ng／ml，红细胞按1∶4的体积比经4次洗涤后，其残留酶量＜10 ng／ml。结论所建立的在血型转变过程中检测微量残留α-半乳糖苷酶的方法，可用于酶解法制备的通用型红细胞的安全性评价。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宫锋	军事医学科学院野战输血研究所	47	194	7.0	11.0
2	季守平	军事医学科学院野战输血研究所	41	231	8.0	13.0
3	李素波	军事医学科学院野战输血研究所	54	223	7.0	11.0
4	高红伟	军事医学科学院野战输血研究所	35	72	4.0	6.0
5	檀英霞	军事医学科学院野战输血研究所	31	157	6.0	11.0
6	贠志敏	军事医学科学院野战输血研究所	2	4	1.0	2.0
7	张雪	军事医学科学院野战输血研究所	7	7	2.0	2.0
8	张士坤	军事医学科学院野战输血研究所	1	1	1.0	1.0