布鲁菌外膜蛋白Omp22基因的原核表达与生物信息学分析

• 作者: 史巧芸 庞峰 张珈宁 徐开莲 成鹰 朱华培 杜丽 焦寒伟 王凤阳 荣辉 贾晓晓 赵天靖 郭莳雨
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 布鲁菌 外膜蛋白22 基因 克隆 原核表达 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 页码范围: 9-12
• 页数: 4页
• 分类号: S852.614
• 字数: 2618字
• 语种: 中文

摘要

克隆布鲁菌 Omp22基因，原核表达后进行生物学信息分析。根据GenBank中羊种布鲁菌 M5-90株基因组 PCR 扩增出639 bp 的目的基因片段，构建克隆重组质粒 pMD-20T-Omp22，转化入 E．coli DH5α。测序正确后构建表达重组质粒 pET-28a-Omp22，转化入 E．coli BL21（DE3）。IPTG 诱导表达， Western blot鉴定诱导融合蛋白。结果表明，成功克隆 Omp22基因，构建 pET-28a-Omp22原核表达载体，在E．coli BL21（DE3）中表达 Omp22基因。DNA Man和BIOEDIT软件生物性息学分析 Omp22融合蛋白二级结构中α-螺旋占22．17％；伸展链占19．81％；β-折叠占2．83％；无规卷曲占55．19％。说明该蛋白具有较高亲水性。