H6N1亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 刘加波 曾婷婷 罗思思 谢志勤 谢芝勋 邓显文 黄娇玲 黄莉
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 H6N1亚型 二重RT-PCR
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 24-27
• 页数: 4页
• 分类号: S852.6
• 字数: 2960字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中H6、N1亚型禽流感病毒(AIV) HA、NA基因,分别设计并筛选出2对特异性引物,用于H6亚型AIV和N1亚型AIV的检测,优化反应条件,建立了H6N1亚型AIV的二重RT-PCR检测方法.对该法进行特异性、敏感性检验,并用该法对临床样品进行检测.所建立的方法对H6N1亚型AIV可特异性扩增出447 bp(H6亚型)和325 bp(N1亚型)目的条带,对H6Ny亚型AIV仅扩增出447 bp目的条带,对HXN1亚型AIV仅扩增出325 bp目的条带,对常见禽病病原体均未扩增出任何条带;该法对H6N1亚型AIV检测下限为5×102拷贝/μL;341份临床样品检测结果与病毒分离鉴定一致.本研究所建立的H6N1亚型AIV RT-PCR特异性强、灵敏度高,一管可同时检测H6和N1亚型AIV,为H6N1亚型AIV的检测提供一种简便、快速和有效的检测方法.