H9和H10亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 张民秀 张艳芳 曾婷婷 李丹 李孟 王盛 罗思思 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文 黄娇玲
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 H9亚型 H10亚型 二重RT-PCR
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 动物科学·生物技术
• 页码范围: 96-99
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3774字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2020.05.026

摘要

[目的]建立可同时鉴别检测H9和H10亚型禽流感病毒(AIV)的二重RT-PCR检测方法.[方法]根据GenBank中H9和H10亚型AIV的HA基因保守序列,分别设计2对特异性引物,优化引物之间的浓度与退火温度等条件,建立了可同时鉴别检测H9和H10亚型AIV的二重RT-PCR检测方法.[结果]特异性试验结果表明,该方法可以特异性扩增出H9和H10亚型AIV对应大小的目的条带,而对其余亚型禽流感病毒及其他禽病病原体均未扩增出特异性条带.同时,该检测方法对H9和H10亚型AIV的扩增下限均为5×104拷贝/μL.临床样品的检测结果表明其与病毒分离结果相一致(100％).[结论]该研究建立的二重RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高,可在一管内同时鉴别检测H9与H10两种亚型AIV,为H9与H10亚型AIV的监测提供了技术支撑.