施马伦贝格病毒RT-LAMP检测方法的建立

• 作者: 吴绍强 张永宁 林祥梅 袁向芬
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 施马伦贝格病毒 检测方法 RT-LAMP 荧光定量RT-PCR 样品检测
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 技 术 支 撑
• 页码范围: 73-77,82
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3622字
• 语种: 中文

摘要

通过对施马伦贝格病毒（Schmallenberg virus，SBV）及其同属各病毒基因序列进行比对分析，设计了针对SBV S基因节段的一组6条特异性引物，经优化建立了SBV RT-LAMP检测方法，可在63℃恒温条件下，于50min内完成目的序列扩增，通过染料法和琼脂糖凝胶电泳法观察结果，其灵敏度可达10TCID50，与荧光RT-PCR方法具有相同的敏感性。特异性试验显示，本方法与同属的沙门达病毒（Shamonda virus）会发生交叉反应，需借助沙门达病毒S基因节段上的一个特异性酶切位点AflII进行酶切，实现两者的鉴别诊断。对103份临床样品的检测结果显示，本方法与荧光RT-PCR方法符合率为100%。本研究建立的RT-LAMP方法快速、简单、灵敏度高，不仅适用于实验室鉴定，还可应用于口岸、野外等的临床大规模监测。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林祥梅	中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所	135	890	13.0	26.0
2	吴绍强	中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所	123	615	14.0	21.0
3	张永宁	中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所	27	112	6.0	9.0
4	袁向芬	中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所	14	82	6.0	9.0