Notch基因胞内活化部分真核表达载体p3XFLAG-CMV7-NICD1的构建与鉴定

• 作者: 刘蕾 肖伟
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: Notch1信号通路 NICD1 上皮间质转化 后囊膜混浊
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 217-220
• 页数: 4页
• 分类号: R776.1
• 字数: 2555字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建Notch1基因胞内活化部分真核表达载体p3XFLAG?CMV7?NICD1，为进一步研究和解析Notch1基因在促进人晶状体上皮细胞间质化过程的作用做准备。方法从SRA01/04细胞中提取总RNA，RT?PCR法反转录合成cDNA。特异扩增目的基因片段NICD1，与p3XFLAG?CMV7载体连接后转化大肠杆菌DH5α，LB平板培养基筛选菌落，抽提质粒。并用酶切，测序，转染细胞后检测蛋白表达等方法验证。结果获得重组的p3XFLAG?CMV7?NICD1真核表达载体质粒，经双酶切及测序检测，NICD1基因插入载体部位正确，碱基序列正确。Western blot结果显示，在转染p3XFLAG?CMV7?NICD1的细胞中有NICD1蛋白的表达。结论 p3XFLAG?CMV7?NICD1真核表达载体质粒构建成功，为进一步研究Notch1传导通路与白内障摘除术后发生后囊膜混浊的关系奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖伟	中国医科大学附属盛京医院眼科	54	275	9.0	13.0
2	刘蕾	中国医科大学附属盛京医院眼科	2	0	0.0	0.0