菌丝霉素NZ2114基因在毕赤酵母中表达及中试发酵研究

• 作者: 冯蓓 叶滔 周玉岩 孙丹丹 杨静美 逯佩凤 闫凯
• 来源期刊: 饲料工业
• 学科: 生物学
• 关键词: 菌丝霉素NZ2114基因 毕赤酵母 发酵 抑菌活性
• 年，卷（期）: 2015,（16）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 54-59
• 分类号: Q939.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.13302/j.cnki.fi.2015.16.012

摘要

构建表达菌丝霉素NZ2114蛋白的真核重组表达质粒pPicZα-NZ2114,并转化毕赤酵母菌GS115,Zeocin抗性筛选阳性重组子,通过PCR鉴定、Tricine-SDS-PAGE分析和琼脂孔穴扩散法筛选获得菌丝霉素NZ2114组成型表达菌株,并采用pH-溶氧监控策略进行工程菌毕赤酵母菌GS-115/pPicZo-NZ2114的50 L中试发酵研究.结果表明,本实验成功实现了菌丝霉素NZ2114基因在毕赤酵母GS115中的组成型表达pPicZα-NZ2114,Tricine-SDS-PAGE分析显示,在4.4 kDa处有明显的目的条带,工程菌经50 L发酵罐诱导培养96 h后取上清,对金黄色葡萄球菌CMCC26003有明显的抑制作用.菌丝霉素NZ2114基因在毕赤酵母中表达的方法在本研究中成功应用,中试研究为以后的规模化生产和应用奠定了基础.