弓形虫棒状体ROP16基因转染RAW264.7的实验研究

• 作者: 储德勇 徐元宏 李源玲 沈继龙 王书书 谢园园 闻慧琴
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: ROP16基因 RAW264.7 慢病毒感染
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1367-1372
• 页数: 6页
• 分类号: R382.33
• 字数: 5453字
• 语种: 中文

摘要

目的 比较目前常用的5种基因导入技术将弓形虫棒状体ROP16基因导入RAW264. 7,选择合适的方法提高转染效率. 方法 以绿色荧光蛋白pEGFP-ROP16融合表达构建质粒,采用 Lipofectamine? 3000 、Attractene 、Fugene? HD转染试剂以及电穿孔转染和慢病毒载体感染RAW264. 7,利用荧光显微镜和流式细胞仪观察目的基因的表达、细胞生长状态并分析转染效率,从而确定最佳的基因导入途径. 结果上述质粒载体对RAW264. 7的转染效率依次为电转法>Fugene? HD>Lipofectamine? 3000>Attractene. 但是电转法转染后细胞死亡率较高,细胞贴壁不牢或死亡;而慢病毒感染效率可达61. 2%,细胞生长状态佳,显著优于质粒载体( P<0. 05). 慢病毒组显著优于4个质粒组(P<0. 05). 结论慢病毒感染可将弓形虫棒状体 ROP16 成功转入RAW264. 7,具有较高的转染效率,效果显著优于质粒载体,目的基因在细胞内获得高效表达. 为弓形虫ROP16的功能研究提供了重要基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐元宏	安徽医科大学第一附属医院检验科	281	2373	24.0	32.0
2	沈继龙	安徽医科大学病原生物学教研室	153	854	13.0	17.0
3	储德勇	安徽医科大学病原生物学教研室	7	20	2.0	4.0
4	谢园园	安徽医科大学病原生物学教研室	6	17	3.0	4.0
5	王书书	安徽医科大学病原生物学教研室	8	44	4.0	6.0
6	闻慧琴	安徽医科大学第一附属医院检验科	12	47	5.0	6.0
10	李源玲	安徽医科大学病原生物学教研室	1	0	0.0	0.0