RGD-TAT-KDRsiRNA慢病毒载体构建及抗肿瘤活性

• 作者: 张俭丽 王杰 郑旭
• 来源期刊: 中国公共卫生
• 学科: 医学
• 关键词: 精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD) 穿膜肽(TAT) 血管内皮细胞生长因子受体(KDR) TAT-RGD-KDR siRNA融合基因 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 594-597
• 分类号: R373.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.11847/zgggws2015-31-05-15

摘要

目的 构建精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD)介导的穿膜肽(TAT)-血管内皮细胞生长因子受体(KDR) siRNA融合基因慢病毒载体,探讨其对人肺癌A549细胞的抑制效果.方法 设计合成编码RGD的2条寡核苷酸链,克隆到pGC/TAT-KDR siRNA载体的TAT下游,构建TAT-RGD-KDR siRNA融合基因载体;慢病毒包装并感染A549细胞;通过Western blot和real-time PCR检测A549细胞KDR基因表达水平;通过噻唑蓝法、双色法流式细胞仪和Transwell侵袭实验检测KDR基因沉默对A549细胞凋亡和侵袭力的影响.结果 测序和Blast比对证实重组载体中的RGD序列与设计一致;TAT-RGD-KDR siRNA融合基因慢病毒载体转染A540细胞KDRmRNA和蛋白表达水平分别为(22.7±3.9)％和(19.3±2.7)％,明显低于TAT-KDR siRNA融合基因慢病毒载体转染组,差异有统计学意义(P＜0.01);该载体具有较强的抑制A549细胞增殖、促进细胞凋亡和抑制细胞体外侵袭力的作用.结论 TAT-RGD-KDR siRNA融合基因慢病毒载体通过抑制细胞KDR mRNA和蛋白表达,抑制A549细胞增殖和侵袭、促进细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王杰	沈阳医学院继续教育学院	33	124	7.0	9.0
2	张俭丽	沈阳医学院附属卫生学校基础护理教研室	8	28	2.0	5.0
3	郑旭		2	4	1.0	2.0