EMA-PCR方法检测饮用水中3种食源性致病菌活菌研究

• 作者: 张宏斌 张梦寒 陆巧荣 陆星羽
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 食源性致病菌 EMA-PCR 活菌检测
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 1845-1849,1885
• 分类号: R155.5
• 语种: 中文

摘要

目的 将EMA (Ethidium Monoazide Bromide)选择渗透性与PCR技术相结合,建立有效快速检测饮用水中3种食源性致病菌活菌EMA-PCR方法.方法 以鼠伤寒沙门菌invA、肠出血性大肠杆菌O157∶H7 rfbE、铜绿假单胞菌oprI基因为PCR检测靶基因,纯培养物提取模板进行PCR,进行EMA使用浓度及灵敏度试验.结果 EMA浓度不大于10μg/ml对活菌DNA扩增没有明显抑制,终浓度为1μg/ml EMA能有效抑制死菌扩增;对鼠伤寒沙门菌、肠出血性大肠杆菌O157∶H7、铜绿假单胞菌的EMA-PCR灵敏度分别为1.2×104 CFU/ml、2×105 CFU/ml、3×104 CFU/ml;用10 μg/ml EMA处理饮用水水样,可同时检测出饮用水中含有的3种食源性致病菌活菌.结论 EMA-PCR方法可一次检测饮用水中3种食源性致病菌活菌,能避免PCR检测可能造成假阳性结果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张梦寒		10	30	3.0	5.0
2	陆星羽		1	6	1.0	1.0