中华绒螯蟹ELOVL6 cDNA全长克隆及其表达分析

• 作者: 姚琴琴 成永旭 施秋燕 杨志刚 杨青 魏帮鸿
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 中华绒螯蟹 长链脂肪酸延长酶6 基因克隆 异源表达 组织表达
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 页码范围: 844-855
• 分类号: Q785|S917.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20151210193

摘要

为了探究中华绒螯蟹自身脂肪酸合成能力,采用RACE技术,克隆获得中华绒螯蟹ELOVL6 cDNA序列全长(GenBank accession:KT779219).该序列全长2247 bp,包括235、873和1139 bp的5'非编码区(5'-UTR)、开放阅读框(ORF)和3'非编码区(3'-UTR),编码290个氨基酸(AA),具有ELOVL家族的全部特征:6个跨膜区、高度保守的组氨酸簇HXXHH、多个保守区以及内质网滞留信号KXKXX.分析发育树表明,ELOVL2与ELOVL5聚为一支,ELOVL6聚为另一支,其中中华绒螯蟹ELOVL6与其他节肢动物ELOVL6聚为一支,与凡纳滨对虾聚为一小支.采用异源表达方法研究ELOVL6编码的蛋白质对脂肪酸的作用,GC-MS结果显示,转基因的酵母培养物C16∶0和C16∶1n-7含量下降,而C18∶0和C18∶1n-9的含量升高,同时有新产物C18∶1n-7产生.通过荧光定量PCR(qPCR)技术研究ELOVL6基因在中华绒螯蟹不同组织及不同脂肪源喂养下的表达情况,显示该基因在肠道、胃、心脏、肝胰腺、胸神经节、肌肉、眼柄、鳃和脑神经节9个组织均有表达,其中在肝胰腺中表达量最高,显著高于其他组织;在不同脂肪源饲喂的结果中,肝胰腺、肌肉、卵巢和精巢4个组织中均有表达,并且各组织在金鱼油组饲喂下表达量最低,其中用全豆油组饲喂后,肝胰腺中的表达情况显著升高,明显高于全鱼油组和鱼油豆油混合组.以上结果综合表明,中华绒螯蟹中ELOVL6能够催化C16的饱和及C16的单不饱和脂肪酸延长,同时受到饲料中不同脂肪源的一定影响,这为探究中华绒螫蟹PUFA合成途径及脂肪酸调控机制提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨志刚	上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室	39	199	9.0	12.0
2	成永旭	上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室	75	457	11.0	17.0
3	魏帮鸿	上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室	9	25	3.0	5.0
4	施秋燕	上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室	6	28	3.0	5.0
5	姚琴琴	上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室	7	69	5.0	7.0
6	杨青	上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室	3	11	2.0	3.0