小鼠β-actin基因的RT-PCR克隆与真核表达

• 作者: 李冬颖 王丹丹
• 来源期刊: 辽东学院学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 小鼠 β-actin基因 RT-PCR 克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 生物科学与环境工程
• 页码范围: 16-20
• 页数: 5页
• 分类号: Q976—33
• 字数: 3425字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14168/j.issn.1673-4939.2016.01.04

摘要

以Trizol-异丙醇法提取小鼠肝脏总RNA, 根据NCBI数据库中小鼠β-actin基因序列设计引物, 采用RT-PCR技术扩增小鼠β-actin基因编码区并测序; 以pcDNA3 .1-flag为载体, 构建β-ac-tin基因真核表达质粒, 继而将其重组产物转染于HeLa细胞, 采用Western blot印迹法鉴定重组蛋白pcD-NA3.1-flag/β-actin的表达水平. 结果表明: 克隆获得的289 bp片段与NCBI数据库中β-actin基因序列完全吻合, 并且成功构建的pcDNA3.1-flag/β-actin真核基因表达载体, 其重组质粒可在HeLa细胞中有效表达约43 ×10 3 KD融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丹丹	辽东学院农学院	25	63	5.0	6.0
2	李冬颖	辽东学院农学院	1	4	1.0	1.0