Fonsecaea monophora多聚酮合酶基因的扩增及敲除载体的构建

• 作者: 何娅 冯姣 孙九峰 席丽艳 张军民 肖星 贺丹 陈志文 陈春梅
• 来源期刊: 中国真菌学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Fonsecaea monophora 多聚酮合酶基因 根癌农杆菌 载体构建
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 70-74
• 页数: 5页
• 分类号: R379.9
• 字数: 3756字
• 语种: 中文

摘要

目的 扩增Fonsecaea monophora中控制黑素合成的多聚酮合酶(polyketide synthases,PKS)基因并测序,构建PKS基因敲除载体.方法 扩增PKS基因,根据测序结果设计引物,从Fonsecaea monophora基因组DNA扩增PKS基因5'-同源臂和3'-同源臂,从质粒pBHt1中扩增潮霉素B抗性标记基因(hyg),最后将各片段插入载体PDHt/sk中.结果 测序得到5 389 bp大小的PKS基因序列,构建了PKS基因的敲除载体,用酶切及测序等方法鉴定载体构建成功.结论 成功构建Fonsecaea monophora PKS基因敲除载体,为研究PKS基因及黑素的生物学功能奠定了良好的基础.