斑节对虾谷氨酰胺合成酶基因的克隆及氨氮胁迫对其时空表达的影响

• 作者: 傅明骏 周发林 李运东 杨其彬 江世贵 邱丽华 陈劲松 马振华 黄建华
• 来源期刊: 上海海洋大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 斑节对虾 谷氨酰胺合成酶 基因克隆 氨氮胁迫 组织表达
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 水产生物技术
• 页码范围: 497-507
• 分类号: S917|S968.22
• 语种: 中文
• DOI: 10.12024/jsou.20150901560

摘要

根据本实验室构建的斑节对虾(Penaeus mondon)cDNA文库得到的EST序列,利用RACE技术获得了斑节对虾谷氨酰胺合成酶基因(PmGS)的cDNA全长序列,进行了相关生物信息学分析,在此基础上采用荧光定量的方法研究了PmGS基因在斑节对虾不同组织、氨氮胁迫过程中差异表达情况.该序列全长1420bp,开放阅读框(ORF)为1086 bp,3’非编码区(UTR)为294 bp,包括含有27个碱基的poly(A)尾,5’非编码区(UTR)为40 bp.ORF可编码361个氨基酸,预测分子量为40.423 ku,理论等电点为6.19.序列含有一个谷氨酰胺结合结构域(Gln-synt_C),8个磷酸化位点,2个糖基化位点.斑节对虾和中国明对虾的GS基因的相似性最高,达99％.PmGS-mRNA在斑节对虾各组织中都有表达,在淋巴组织中表达量最高,其次为鳃组织,在胸神经中的表达量最低.96 h高浓度氨氮胁迫后,PmGS-mRNA在肝胰腺中的表达水平显著高于对照组,但在鳃中的表达水平显著低于对照组(P＜0.05).以上结果暗示,PmGS在氨氮代谢方面具有重要的作用,可能参与了斑节对虾机体的急性氨氮胁迫应答反应.