米蛾β-actin基因cDNA片段的克隆及表达量检测

• 作者: 丛斌 张明珠 张统书 段立佳 王晓静 胡志凤 董辉
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 米蛾 β-actin基因 反转录PCR 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 24-28
• 页数: 5页
• 分类号: S433.4
• 字数: 3327字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2016.01.005

摘要

为克隆米蛾[Corcyra cephalonica(Stainton)]β-actin基因cDNA片段,建立米蛾[β-actin基因实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法,并评估其在实时荧光定量研究中作为内参基因的可靠性,利用反转录PCR(RT-PCR)技术克隆获得米蛾β-actin基因cDNA片段,采用SYBR Green Ⅰ染料法建立qRT-PCR方法,检测在米蛾卵、幼虫、蛹和成虫4个虫态中β-actin基因的表达量.获得了长为822bp的米蛾β-actin基因片段(GenBank accession:KJ599569),编码273个氨基酸残基;荧光定量标准曲线的Ct值检测范围为13～28,扩增效率为90.1％,相关系数R2=0.992,溶解曲线分析结果显示产物为特异的单峰,其Tm值为(84±0.5)℃,符合定量要求;实时荧光定量结果表明,β-actin基因在米蛾不同发育历期中的表达水平无显著性差异(p＞0.05).成功建立了米蛾β-actin基因qRT-PCR方法,β-actin基因可以作为米蛾基因表达定量研究中的可靠内参基因.研究结果为β-actin作内参基因进行米蛾功能基因表达差异研究奠定了分子基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丛斌	沈阳农业大学植物保护学院	154	1944	21.0	37.0
2	董辉	沈阳农业大学植物保护学院	100	554	13.0	16.0
3	胡志凤	沈阳农业大学植物保护学院	9	57	5.0	7.0
4	张统书	沈阳农业大学植物保护学院	8	32	3.0	5.0
5	段立佳	沈阳农业大学植物保护学院	5	14	2.0	3.0
6	张明珠	沈阳农业大学植物保护学院	2	3	1.0	1.0
7	王晓静	沈阳农业大学植物保护学院	1	0	0.0	0.0