牛支原体武威株脂蛋白P48基因的克隆、原核表达及亚细胞定位

• 作者: 包世俊 李娜 温峰琴 胡国明 胡永浩 苏炜德 邢小勇 项海涛
• 来源期刊: 甘肃农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 牛支原体 P48 基因克隆 原核表达 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 动物科学·动物医学
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: Q7
• 字数: 4907字
• 语种: 中文

摘要

[目的]验证牛支原体P48蛋白在细胞中的位置,并为后续功能的研究奠定基础.[方法]运用OverlapPCR扩增获得点突变后的牛支原体武威分离株P48基因,并将其克隆至pGEM-T Easy,将测序正确的质粒克隆至表达载体pET-28a中,构建原核表达质粒pET-P48,表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),并在IPTG诱导下成功获得融合蛋白表达产物rMbP48,大小约为51 ku.重组蛋白纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.在分离牛支原体膜蛋白的基础上应用Western-blot及间接ELISA对P48蛋白在细胞中的分布进行分析.[结果]P48蛋白主要存在于牛支原体的膜分离相.全菌免疫荧光试验进一步证实脂蛋白P48位于牛支原体的膜表面.[结论]牛支原体P48蛋白是存在于牛支原体表面的一种具有免疫原性的脂蛋白.本研究为进一步研究P48蛋白的生物学特性及建立高效的牛支原体诊断方法奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡永浩	甘肃农业大学动物医学院	96	391	9.0	16.0
2	邢小勇	甘肃农业大学动物医学院	42	49	4.0	4.0
3	温峰琴	甘肃农业大学动物医学院	36	45	4.0	5.0
4	包世俊	甘肃农业大学动物医学院	43	52	4.0	5.0
5	胡国明	甘肃农业大学动物医学院	6	9	2.0	3.0
6	项海涛	甘肃农业大学动物医学院	16	16	3.0	3.0
7	李娜	甘肃农业大学动物医学院	14	46	4.0	6.0
8	苏炜德	甘肃农业大学动物医学院	3	8	2.0	2.0