Bt（Cry1F）毒素多克隆抗体制备及其检测应用

• 作者: 仲建锋 刘媛 刘贤金 张存政 张霄 徐重新 程诚 胡晓丹
• 来源期刊: 农产品质量与安全
• 关键词: Bt毒素 Cry1F毒素 多克隆抗体 时间分辨荧光免疫分析
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 检验检测
• 页码范围: 47-51
• 页数: 5页
• 字数: 3915字
• 语种: 中文

摘要

通过免疫新西兰大白兔，制备并纯化Bt(Cry1F）毒素多克隆抗体，建立针对Cry1F毒素检测的免疫学分析方法，用于室内分析毒素在农产品和土壤中的残留情况。采用皮下注射法，经4次级联免疫，获得免疫血清效价为1：2500000，经柱纯化后，测得抗体浓度为4.70 mg/mL；并以其建立的针对Cry1F毒素的间接非竞争时间分辨荧光免疫分析方法(TRFIA），测得线性检测范围在0.04～2000 ng/mL，最低检测灵敏度为0.03 ng/mL，对5种供试毒素类似物(Cry1Ab、 Cry1Ac、 Cry1B、Cry1C、 Cry2A）均具一定交叉识别能力。分别以稻米和黄土为基质，进行添加回收试验，测得批内、批间的稳定性和重复性均达到室内仪器检测要求。