产酸克雷伯氏菌赖氨酸脱羧酶的异源表达及粗酶性质

• 作者: 于丽珺 徐岩 李乃强
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 赖氨酸脱羧酶 产酸克雷伯氏菌 戊二胺 异源表达 pH稳定性
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 生物育种与工艺优化
• 页码范围: 527-531
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.150380

摘要

赖氨酸脱羧酶,可以催化赖氨酸脱羧生成戊二胺.戊二胺是重要的平台化合物,可以合成新型聚酰胺材料、脂肪族异氰酸酯等新材料.本研究对来自于产酸克雷伯氏菌的赖氨酸脱羧酶进行异源表达.以pUC 18质粒为载体,将来源于产酸克雷伯氏菌的赖氨酸脱羧酶基因ldc克隆到大肠杆菌,得到菌株LN18.在添加0.5 mmol/L IPTG的LB培养基中,对LN18进行摇瓶培养,发酵液酶活可达到35 U/g发酵液,从发酵液制备的赖氨酸脱羧酶粗酶蛋白的酶活可以达到30 000 U/g粗蛋白.产酸克雷伯氏菌赖氨酸脱羧粗酶蛋白大小约80 kDa,粗酶的最适温度和pH值分别为55℃和5.5,与文献中报道的大肠杆菌的赖氨酸脱羧酶CadA在pH 8.0几乎没有酶活不同,产酸克雷伯氏菌的赖氨酸脱羧酶在pH 8.0的酶活达到最优pH下酶活的30％以上.金属离子对酶活有一定的影响,Mg2+对酶活有促进作用,Fe2+、Zn2+、Ca2+有一定的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐岩	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	233	3264	31.0	46.0
2	李乃强	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	12	29	4.0	4.0
6	于丽珺		1	0	0.0	0.0