色氨酸酶重组基因表达及其酶法合成L-色氨酸

• 作者: 冯莹莹 刘均忠 刘茜 张宏娟 焦庆才 高亮
• 来源期刊: 精细化工
• 学科: 工学
• 关键词: 产气肠杆菌 色氨酸酶 吲哚 丙酮酸发酵液 L-色氨酸 生物工程
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 137-141
• 分类号: TQ464.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.13550/j.jxhg.2016.02.004

摘要

为实现色氨酸酶高效、低成本催化合成L-色氨酸,利用pET30a为载体在宿主细胞E.coli BL21(DE3)中重组表达了产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)来源的色氨酸酶,以丙酮酸、吲哚和氨为底物,探究其酶学性质,考察了反应温度、起始pH、底物摩尔比对酶促反应的影响,并利用丙酮酸发酵液为底物酶法合成L-色氨酸.结果表明,色氨酸酶重组表达成功,色氨酸酶最佳反应条件为:温度35℃,起始pH =9.0,底物摩尔比n(吲哚)∶n(丙酮酸)=0.6∶1,底物丙酮酸浓度为0.17 mol/L.利用重组色氨酸酶全细胞催化100 mL浓度为0.57 mol/L丙酮酸发酵液,流加浓度为4.27 mol/L吲哚酒精溶液6.5 mL,反应28 h后,L-色氨酸浓度达0.25 mol/L,吲哚摩尔转化率达91.8％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宏娟	南京医科大学药学院	14	37	3.0	5.0
2	刘均忠	医药生物技术国家重点实验室南京大学生命科学学院	12	51	4.0	6.0
3	刘茜	医药生物技术国家重点实验室南京大学生命科学学院	12	81	6.0	8.0
4	焦庆才	医药生物技术国家重点实验室南京大学生命科学学院	17	111	7.0	10.0
5	高亮	医药生物技术国家重点实验室南京大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0
6	冯莹莹	医药生物技术国家重点实验室南京大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0