人牙本质涎磷蛋白启动子驱动LacZ报告基因在人牙胚间充质细胞中表达

• 作者: 李水琴 林妍 林美珍 蒋梅琴 黄义德
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 牙本质涎磷蛋白 启动子 人牙胚间充质细胞 LacZ基因
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 生物技术与方法
• 页码范围: 1133-1144
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.150490

摘要

牙本质涎磷蛋白(DSPP)的表达是细胞向成牙本质细胞分化的标志.试图分析人DSPP启动子及构建人DSPP启动子驱动的LacZ基因表达的报告体系,从而方便快捷检测细胞是否向成牙本质细胞分化.为了建立能表达DSPP的细胞体系,分离了人牙胚间充质细胞,并用地塞米松诱导培养液进行诱导,结果显示,该诱导培养液能有效地诱导人牙胚间充质细胞DSPP基因的表达.利用双荧光素酶报告系统对4段人DSPP基因5'上游区域(-4 000-+54、-2 500-+54、-1 447-+54和-1 027-+54)进行分析,结果显示-2 500-+54区域的启动子活性最高.5'上游区从-2 500 bp延长到-4 000 bp时,启动子活性下降;5'上游区从-2 500 bp缩短至-1 447 bp时,启动子活性下降;再次将-1 447 bp缩短至-1 027 bp时,启动子活性进一步下降.结果暗示在-4 000 bp至-2 500 bp区域存在转录抑制元件,-2 500 bp至-1 027 bp区域存在转录激活元件.用-2 500-+54启动子区域和LacZ基因构建phDSPP-LacZ慢病毒报告载体,并分别在人牙胚间充质细胞和永生化人牙胚间充质细胞系ihEDMC4上检测phDSPP-LacZ报告载体的功能,通过X-Gal染色,结果显示在2种细胞牙向分化过程中均可检测到LacZ基因的表达.研究构建的phDSPP-LacZ慢病毒报告载体可为诱导人源细胞牙向分化、牙齿发育、牙齿再生工程等研究中DSPP的表达检测提供一种更加便捷的手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄义德	福建师范大学生命科学学院福建省发育与神经生物学重点实验室	24	106	4.0	9.0
2	林美珍	福建师范大学生命科学学院福建省发育与神经生物学重点实验室	1	0	0.0	0.0
3	蒋梅琴	福建师范大学生命科学学院福建省发育与神经生物学重点实验室	3	0	0.0	0.0
4	李水琴	福建师范大学生命科学学院福建省发育与神经生物学重点实验室	2	2	1.0	1.0
5	林妍	福建师范大学生命科学学院福建省发育与神经生物学重点实验室	5	2	1.0	1.0