miR-20b直接靶向3'-UTR负性调节VEGF的表达

• 作者: 宋传旺 汪忆梦 陶象男
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮生长因子 3'-非编码区 miR-20b 双荧光素酶报告载体
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-26
• 页数: 5页
• 分类号: R392.3
• 字数: 3377字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2016.01.005

摘要

目的 探讨miR-20b是否直接靶向VEGF3'-非编码区(3'-UTR)而调控其表达.方法 采用miRanda软件预测VEGF3'-UTR是否存在miR-20b的结合位点;使用PCR方法扩增RAW264.7细胞VEGF基因3'-UTR序列,经双酶切后克隆到pmiR-RB-ReportTM质粒海肾荧光素酶的下游,得到pmiR-RB-Repor tTM-VEGF 3'-UTR双荧光素酶重组质粒,使用电泳法和测序法进行验证;将重组质粒或空质粒与miR-20b模拟物或其对照共转染HeLa细胞,24 h后检测相应荧光素酶活性.结果 VEGF3'-UTR存在miR-20b的结合位点;获得了含VEGF 3'-UTR的双荧光素酶报告载体;重组质粒与miR-20b模拟物共转染组HeLa细胞的荧光素酶活性明显低于空质粒转染组(P＜0.05).结论 成功构建小鼠VEGF基因3'-UTR双荧光素酶报告载体,miR-20b可以直接靶向VEGF3'-UTR而负性调控其表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶象男	蚌埠医学院第二附属医院检验科	5	4	1.0	2.0