猴D型逆转录病毒p27基因的克隆表达及诊断价值评价

• 作者: 周洁 杨燕飞 胡建华 陶凌云 高诚
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 猴D型逆转录病毒 p27基因 原核表达 血清学检测
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 270-275
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4889字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2016.04.005

摘要

目的 克隆表达猴D型逆转录病毒(SRV) p27基因,评价其诊断价值.方法 PCR扩增p27基因片段,定向克隆至原核表达载体pET-28b(+),重组质粒转化大肠杆菌Rosetta (DE3)中诱导表达,利用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定,目的蛋白经镍柱亲和层析纯化后用ELISA方法评价其诊断价值.结果 重组质粒转化宿主菌后在37℃,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓-度为0.5 mmol/L的条件下诱导4h,可溶性p27蛋白表达量最大,且具有免疫学活性.纯化后测定融合蛋白浓度为2.043 g/L,纯度93.3％,以融合蛋白为诊断抗原包被ELISA板检测3份标准阳性血清和22份阴性血清,检出率为100％.结论 p27基因成功表达并具有良好的反应原性,可作为猴D型逆转录病毒血清学检测的候选抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高诚		61	229	7.0	12.0
2	胡建华		55	297	7.0	15.0
3	周洁		19	51	5.0	6.0
4	陶凌云		14	15	2.0	3.0
5	杨燕飞		2	7	1.0	2.0