低温诱导的位点特异性重组植物表达载体构建及小麦转化

• 作者: 刘香利 徐广博 王梅 赵惠贤
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 低温诱导 wcs120启动子 CinH/RS2位点特异性重组 选择标记基因
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 478-487
• 分类号: Q789
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2016.04.002

摘要

选择标记基因的剔除是转基因植物商品化种植的重要基础.为建立小麦(Triticum aestivum)低温诱导的位点特异性标记基因删除体系,本研究以小麦西农928基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得小麦低温诱导表达wcs120启动子,序列分析表明,该序列与GenBank中序列AF031235相比有一段21 bp插入,与AY493570.1序列完全一致.以含有CinH/RS2单向位点特异性重组系统的植物表达载体pXL5513为框架,成功构建了包含有抗旱相关性基因PYL5(pyrabactin-resistance like gene 5)表达框的低温诱导的位点特异性重组植物表达载体pXL5513-fwcs-RDA;并对小麦绵阳19(M19)幼胚愈伤组织进行基因枪转化,1 745块愈伤组织经筛选分化共获得9株转基因植株,经PYL5基因特异引物PCR检测,6株为阳性植株,低温春化处理后经删除引物PCR检测,6株阳性植株初步证实成功删除了选择标记基因.本研究为利用低温诱导的位点特异性重组系统进行小麦无标记基因转化奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王梅	西北农林科技大学生命科学学院	11	208	6.0	11.0
2	徐广博	西北农林科技大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0