H-NS蛋白对副溶血弧菌hcp1的转录调控

• 作者: 周冬生 张义全 殷喆 王洁 董新波 高丽晓
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 副溶血弧菌 H-NS hcp1 转录调控
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 143-149
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20150144

摘要

[目的]研究调控子H-NS对副溶血弧菌T6SS1结构蛋白基因hcp1的转录调控机制.[方法]利用Western blot检测Hcp1蛋白在野生株(WT)和hns基因敲除株(△hns)中表达水平的差异.提取WT和△hns的总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法验证H-NS对hcp1的转录调控关系.进而采用引物延伸实验研究hcp1的转录起始位点,并根据产物的丰度判断H-NS对hcp1的调控关系.PCR扩增hcp1的整个启动子区DNA序列,并纯化His-H-NS蛋白,通过凝胶阻滞实验(EMSA)验证His-H-NS对hcp1启动子区是否具有直接的结合作用.[结果]Western blot和实时定量RT-PCR结果显示H-NS能抑制hcp1的表达;引物延伸结果显示hcp1只有一个转录起始位点T(-62)(翻译起始位点为+1),且其转录活性是H-NS和σ54依赖性的;EMSA实验表明H-NS对hcp1的启动子区具有直接的结合作用.[结论]H-NS能直接结合到hcp1启动子区而抑制其转录表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周冬生	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	36	288	10.0	15.0
2	王洁	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	23	197	5.0	14.0
3	殷喆	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	3	7	2.0	2.0
4	董新波	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	2	9	2.0	2.0
5	高丽晓	中国人民解放军总装备部科技信心研究中心门诊部	1	3	1.0	1.0