动物过敏原牛血清白蛋白间接竞争ELISA检测方法的建立

• 作者: 吕青骎 周光宏 徐幸莲 朱业培 王玮 钱行
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 工学
• 关键词: 牛血清白蛋白 动物过敏原 单克隆抗体 间接竞争ELISA 检测
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 页码范围: 305-311
• 分类号: TS207.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/jnau.20150814

摘要

[目的]制备鼠抗牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)单克隆抗体,在此基础上建立可用于定量检测动物过敏原BSA含量的间接竞争酶联免疫检测方法(IC-ELISA).[方法]采用BSA纯品为抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合技术制备抗BSA单克隆抗体,并对其特异性进行鉴定;在此基础上,建立BSA间接竞争ELISA检测方法,并对其分析条件进行优化.[结果]采用自行制备的特异性抗BSA单克隆抗体,建立间接竞争ELISA检测方法,优化得到最佳反应条件:抗原最佳包被浓度为0.25 μg· mL-1,单抗最佳工作浓度为1∶32000,酶标二抗最佳工作浓度为1∶10000,最低检测限为6.71ng· mL-,线性检测范围为3.593 8～460 ng·mL-1.线性回归直线方程为y=-47.448 9x+135.866 3,相关系数R2=0.997 3,P＜0.000 1.[结论]该方法特异性强、灵敏度高、可靠性好,适用于食品中过敏原BSA的现场快速检测.