单增李斯特菌内化素A单克隆抗体制备及胶体金免疫层析试纸条的研制

• 作者: 刘小熙 刘美辰 张彦明 郭健 韩金媛
• 来源期刊: 粮食科技与经济
• 关键词: 单增李斯特菌 胶体金免疫层析试纸条 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 检测与标准
• 页码范围: 30-34
• 页数: 5页
• 字数: 4633字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16465/j.gste.cn431252ts.20160609

摘要

将单增李斯特菌的内化素A（InlA）基因片段进行密码子优化后，合成基因并插入到质粒载体pET28a中，构建原核表达重组质粒。经过乳糖自诱导表达后，获得了大小为48 kD的重组蛋白。用Ni亲和层析方法纯化重组表达后的InlA蛋白片段。用该蛋白免疫BALB/C小鼠，筛选高效的InlA单克隆抗体细胞株，并制备单克隆抗体，共筛选出3株亲和力较高的单克隆抗体，筛选得到的InlA单克隆抗体经过Protein G亲和层析纯化。研制双抗夹心法胶体金免疫层析试纸条，并对其敏感性、特异性等指标进行评价。该试纸条灵敏度达到1×106 CFU/mL，用实际样本加标后，对该胶体金试纸条进行验证，并用国标方法做了对比。结果表明，该试纸条能满足样本中单增李斯特菌的检测要求。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘美辰		10	46	3.0	6.0
2	郭健		9	51	4.0	6.0
3	张彦明		3	8	2.0	2.0
4	韩金媛		1	3	1.0	1.0
5	刘小熙		1	3	1.0	1.0