重组精氨酸脱亚胺酶的制备工艺

• 作者: 何云凤 范开 郭晋霞
• 来源期刊: 重庆理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 精氨酸脱亚胺酶 发酵 复性 分离纯化
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 药学?医学
• 页码范围: 73-78
• 页数: 6页
• 分类号: Q3441.13
• 字数: 3376字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8425(z).2016.04.013

摘要

研究了重组精氨酸脱亚胺酶（rADIES）的30 L 规模发酵、制备工艺及其生物学活性。将构建好的工程菌先进行摇瓶活化获得种子液，转入30 L 发酵罐进行培养，用 IPTG 进行诱导表达；表达产物进行高压匀浆破菌、包涵体洗涤、溶解稀释复性后经 DEAE 阴离子交换层析柱和 Butyl 疏水层析柱纯化；通过 SDS-PAGE 和 RP-HPLC 等方法检测表达和纯度；用体外测活法检测活性。将工程菌进行放大培养并诱导表达，获得了相对分子质量在46 xDa 的 rADIES。重组蛋白表达量占总蛋白的25%以上，经制备工艺获得的 rADIES 纯度高于95%，酶活性为42 IU。实验结果表明：该工艺具有可行性，可以获得较高活性的重组精氨酸脱亚胺酶。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何云凤	重庆理工大学药学与生物工程学院	2	4	1.0	2.0
2	郭晋霞	重庆理工大学药学与生物工程学院	3	6	2.0	2.0
3	范开		15	56	4.0	7.0