精氨酸脱亚胺酶在大肠杆菌中的分泌型表达

• 作者: 倪晔 孙志浩 李娜
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 工学
• 关键词: 精氨酸脱亚胺酶 分泌型 表达
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-6
• 分类号: TQ460.38
• 字数: 4074字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2012.01.001

摘要

将变形假单胞菌的精氨酸脱亚胺酶(ADI)编码基因arcA克隆至具有阿拉伯糖启动子的分泌型表达载体pBAD/gⅢ B中,经鉴定得到重组质粒pBAD-ADI.将重组质粒转化大肠杆菌TOP10F’后进行诱导表达,分别考察了不同诱导物L-arabinose浓度、诱导温度、诱导时间对重组蛋白表达的影响,最适诱导条件为L-arabinose浓度0.002％ (w/v),25℃下诱导5h,全细胞的酶活为68 mU/mL(指单位发酵液体积,下同).采用Osmotic Shock法使ADI从胞周质释放出来,经检测分泌到胞周质的重组蛋白活性为53 mU/mL,细胞内的酶活为34 mU/mL.SDS-PAGE分析显示,重组蛋白大小约为46 kD.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙志浩	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	71	977	19.0	28.0
5	李娜	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	17	33	4.0	5.0
9	倪晔	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	41	199	9.0	12.0