金黄色葡萄球菌肠毒素C3过表达慢病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 唐爱国 宋欢 张婷婷 李先平 李碰玲 杨敏 王敏 董智慧 谢益欣
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌肠毒素C3 慢病毒 载体构建 过表达
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1323-1326,1332
• 页数: 5页
• 分类号: R730.54
• 字数: 4051字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2016.09.017

摘要

目的：构建金黄色葡萄球菌肠毒素C3（SEC3）过表达慢病毒载体并体外检测其表达目的基因。方法：聚合酶链反应（PCR）扩增SEC3基因片段；用AgeI 酶切线性化GV365慢病毒载体，通过连接反应构建GV365-SEC3载体，运用PCR方法鉴定阳性克隆载体；转染293T 细胞包装慢病毒，观察细胞荧光及Western blot 检测慢病毒载体表达，HIV-1 p24 ELISA 法测定慢病毒载体滴度。结果：获得目的基因，并成功构建GV365-SEC3慢病毒载体，通过PCR 及DNA 测序鉴定，证明GV365-SEC3质粒构建正确；转染293T 细胞后可观察到大量荧光细胞，经蛋白电泳得到29 kD 大小的蛋白条带，与目的基因蛋白相符合，ELISA 检测病毒载体滴度为5×108 TU／ml。结论：成功构建GV365-SEC3过表达慢病毒载体，为后期研究其体内外对抗肿瘤的作用与机制奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王敏	中南大学湘雅二医院检验科	175	1039	16.0	24.0
2	李先平	中南大学湘雅二医院检验科	50	198	8.0	10.0
3	杨敏	中南大学湘雅二医院检验科	85	535	13.0	17.0
4	张婷婷	中南大学湘雅二医院检验科	16	49	3.0	6.0
5	宋欢	中南大学湘雅医学院医学检验系	3	2	1.0	1.0
6	谢益欣	中南大学湘雅二医院检验科	2	1	1.0	1.0
7	李碰玲	中南大学湘雅二医院检验科	2	1	1.0	1.0
8	董智慧	中南大学湘雅医学院医学检验系	2	1	1.0	1.0
9	唐爱国		1	1	1.0	1.0