点青霉葡萄糖氧化酶基因的克隆及其酶学性质研究

• 作者: 吴芳彤 王云鹏 罗同阳 胡常英 胡美荣 陶勇 高庆华
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 葡萄糖氧化酶 点青霉菌 重组表达
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 152-159
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.07.023

摘要

旨在克隆点青霉菌（Penicillium notatum）中的葡萄糖氧化酶基因（GOD），在毕赤酵母（Phchia pastoris）中异源表达，纯化并研究其酶学性质。利用 PCR 技术从点青霉 No.8312菌株的基因组 DNA 中克隆得到 GOD 基因，将该基因克隆到穿梭载体 pMD-AOX 上并在毕赤酵母 X33中表达，对纯化后的葡萄糖氧化酶的酶学性质进行分析。结果显示，X33-GOD 可高表达具有活性的 GOD，在30℃、pH6.5的条件下，其培养液上清 GOD 酶活可达496 U/mL，比活123.0 U/mg ；重组表达的葡萄糖氧化酶最适温度为40-45℃，最适 pH 为6.0，酶的稳定性研究表明，该酶在 pH3.5-7.0区间和温度低于50℃下稳定。1 mmol/L Zn2+对其有激活作用；Ag+对该酶活性有较大抑制作用。构建出 GOD 的高产毕赤酵母工程菌株，与点青霉 GOD 相比，具有更高的发酵酶活和比活。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶勇	中国科学院微生物研究所	49	311	9.0	16.0
2	胡美荣	中国科学院微生物研究所	12	54	5.0	6.0
3	胡常英		16	197	8.0	14.0
4	王云鹏		16	200	8.0	14.0
5	罗同阳		11	33	4.0	5.0
6	吴芳彤		7	24	3.0	4.0
7	高庆华		2	8	2.0	2.0