靶向hTERT、hTR新型RNAi表达框架的构建及应用效果观察

• 作者: 刘蕾 彭剑雄 朱文琦 李亚红 赵丹丹 黄丹
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 末端转移酶端粒 RNA干扰 表达框架
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1738-1744
• 页数: 7页
• 分类号: R730.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3978/j.issn.1005-6947.2016.12.012

摘要

目的：构建靶向hTERT、hTR的新型RNAi表达框架，探讨单独及联合干扰hTERT、hTR基因对肿瘤细胞端粒酶活性、细胞凋亡及周期的影响，以期找到肿瘤基因治疗的新策略。<br>　　方法：融合PCR构建靶向hTERT、hTR的RNAi表达框架。各表达框架经鉴定后分别或联合转染A549细胞，TRAP-银染法及TRAP-qPCR法检测端粒酶活性，流式细胞仪检测细胞凋亡及周期。<br>　　结果：靶向hTERT、hTR的新型RNAi表达框架构建成功。与空白对照组或阴性对照组比较，无论转染靶向hTERT或靶向hTR的RNAi表达框架后，A549细胞的端粒酶活性均明显降低，细胞凋亡率均明显增加，细胞G1阻滞明显增加，而联合转染靶向hTERT与靶向hTR的RNAi表达框架后，A549细胞的上述改变较各自单独转染更为明显（均P<0.05）。<br>　　结论：靶向hTERT、hTR的新型RNAi表达框架能够有效抑制A549细胞的端粒酶活性，诱导细胞凋亡，改变细胞周期。以人工miRNA表达框架为基础的新型RNAi技术有望成为肿瘤基因治疗的新工具。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄丹	中南大学湘雅医学院医学检验系	16	119	7.0	10.0
2	彭剑雄	中南大学湘雅医学院医学检验系	27	57	4.0	6.0
3	刘蕾	中南大学湘雅医学院医学检验系	19	49	4.0	6.0
4	赵丹丹	中南大学湘雅医学院医学检验系	6	2	1.0	1.0
5	李亚红	中南大学湘雅医学院医学检验系	5	2	1.0	1.0
6	朱文琦	中南大学湘雅医学院医学检验系	1	0	0.0	0.0