miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 刘红莉 周萍 杨玉琮 王聪 胡健 陶丹
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miRNA 肝癌 Taqman探针 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 10-13
• 页数: 4页
• 分类号: R735.7|Q503
• 字数: 3644字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2016.04.003

摘要

目的 建立一种用于肝癌早期诊断和监测的血清miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR检测方法.方法 采用Trizol法提取肝癌患者血清中总RNA,以肝癌发生具有代表性的miRNA-125a基因为检测序列,分别设计逆转录引物、扩增引物和Taqman探针;构建和制备miRNA-125a重组质粒标准品,建立血清miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR检测方法.结果 成功构建了miRNA-125a重组质粒载体,制备了miRNA-125a重组质粒标准品,建立了血清miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR扩增体系.经实验验证,所设计引物具有较好的特异性,引物的最低检测限为78.125copies/μl;对17例肝癌患者血清miRNA-125a的检测结果在(1.45×102～3.52×105) copies/μl之间.结论 血清miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR检测方法的建立,为原发性肝癌早期诊断和监测提供一种新的分子诊断定量方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨玉琮	西安交通大学第一附属医院检验科	45	193	8.0	11.0
2	胡健	西安交通大学第一附属医院检验科	14	82	7.0	8.0
3	周萍	西安交通大学第一附属医院检验科	28	132	8.0	10.0
4	王聪	西安交通大学第一附属医院检验科	21	68	6.0	8.0
5	刘红莉	西安交通大学第一附属医院检验科	6	16	2.0	4.0
6	陶丹	西安交通大学第一附属医院检验科	7	33	3.0	5.0