树鼩腺病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 代解杰 孙晓梅 宋庆凯 张志成 李晓飞 王璇 苗雨润 袁圆
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 树鼩腺病毒 3'保守区域 TaqMan 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 72-77
• 页数: 6页
• 分类号: R-33
• 字数: 3656字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2018.03.014

摘要

目的 通过建立树鼩腺病毒(tree shrew adenovirus,TAV)TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,快速准确地检测树鼩腺病毒.方法 根据TAV全基因组3'端保守序列设计合成特异性引物;用含目的基因片段的重组质粒作为标准品进行标准曲线绘制,建立TAV TaqMan实时荧光定量PCR检测方法.结果 建立的TAV实时荧光定量PCR检测方法特异性好,与树鼩源及其他物种常见病毒无交叉反应;方法的最低检测限度为每微升3.7拷贝,灵敏性强;相关检测系数R2为0.998,扩增效率为95.7%;扩增结果具有良好的线性关系,且重复性检测效果好.结论 成功建立了TAV TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,灵敏度高,重复性好,可用于TAV感染的早期快速检测.