鹿茸富脯氨酸多肽-APRP基因融合表达载体的构建及表达

• 作者: 史文婷 曲晓波 董文博 郭寰宇 郭焱
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: APRP GST-APRP 融合表达载体 诱导表达
• 年，卷（期）: 2016,（23）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 4419-4422
• 分类号: R285.5|S825|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2016.23.005

摘要

目的:构建鹿茸富脯氨酸多肽(APRP)基因融合表达载体,并诱导表达融合蛋白GST-APRP.方法:以鹿茸顶端组织总cDNA为模板,PCR方法扩增目的片段,连接pMDTM18-T载体,转化E.coli DH5α进行TA克隆.酶切与测序鉴定合格后,将目的片段与pGEX-6P-1质粒连接,完成pGEX-6P-1-APRP融合表达载体的构建.利用原核表达系统进行初步诱导表达.SDS-PAGE蛋白电泳检测蛋白表达情况.结果:PCR成功扩增出目的基因片段,目的基因片段大小为216 bp.提取表达载体质粒经酶切及测序分析证实pGEX-6P-1-APRR融合表达载体构建成功.利用终浓度为0.5 mMIPTG诱导,融合蛋白成功表达,分子量为35 kDa.结论:目前利用基因工程技术获得特定的鹿茸多肽的报道很少.本研究结果表明,利用原核表达系统可在体外对鹿茸富脯氨酸多肽基因(APRP)进行融合表达,并且融合蛋白GST-APRP以可溶形式表达,有利于进一步研究APRP.这也为研究其他鹿茸多肽单体成分提供重要参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曲晓波		92	847	15.0	25.0
2	郭焱		49	175	7.0	11.0
3	郭寰宇		10	9	1.0	3.0
4	董文博	吉林大学第一医院二部	3	6	1.0	2.0
5	史文婷		6	1	1.0	1.0