DD3启动子调控 TRAIL 过表达载体的构建及腺病毒包装

• 作者: 刘雷 周建华 李坚伟 陈统权 黄星华
• 来源期刊: 现代肿瘤医学
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒 TRAIL DD3 PCA3
• 年，卷（期）: 2016,（17）
• 所属期刊栏目: 论 著 -- 基础研究
• 页码范围: 2686-2689
• 页数: 4页
• 分类号: R730.51
• 字数: 4353字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4992.2016.17.005

摘要

目的：构建 DD3（PCA3）启动子调控的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 TRAIL 过表达腺病毒载体，并对其进行病毒包装及滴度测定。方法：将 DD3启动子用分子克隆技术替换掉穿梭质粒 pHBAd －U6－GFP原有启动子 U6，再用 AgeI 单酶切将制备的重组质粒 pHBAd －DD3－GFP 线性化，将 TRAIL 基因片段克隆至线性化 pHBAd －DD3－GFP 上，经抗性筛选后 PCR 及测序鉴定为 pHBAd －DD3－TRAIL 载体。将其连同病毒骨架质粒 pHBAd －BHG 共同转染至 HEK293细胞包装成病毒并扩增，测定病毒感染性滴度。结果：经 PCR及测序验证证实成功构建 DD3启动子调控的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 TRAIL 过表达腺病毒载体 pH-BAd －DD3－TRAIL 并包装扩增，病毒滴度为1．58×1010 PFU ／ml。结论：构建 DD3启动子调控的凋亡配体TRAIL 过表达重组腺病毒，可用于下一步在前列腺癌细胞中特异性地表达及诱导细胞凋亡杀伤靶细胞效应研究中。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李坚伟		7	14	3.0	3.0
2	周建华		36	131	7.0	9.0
3	刘雷		10	18	3.0	3.0
4	黄星华		7	4	1.0	1.0
5	陈统权		5	3	1.0	1.0