DEC 1基因真核表达质粒的构建及对乳腺癌细胞增殖的影响

• 作者: 于晶 代云峰 刘云龙 崔博舒 潘洪明 薛瞡 衣同辉 郎尉雅 鲍红光
• 来源期刊: 中外女性健康研究
• 关键词: DEC1 乳腺癌 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2016,（14）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 206-206,217
• 页数: 2页
• 字数: 1480字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建DEC1真核表达载体pEGFP-Nl-DEC1，探讨DEC1基因对乳腺癌细胞增殖的影响及可能机制。方法：提取人乳腺癌癌细胞MCF-7总RNA，扩增获得DEC1基因，将DEC1基因插入真核表达质粒pEGFP-Nl ，将成功构建的pEGFP-Nl-DEC1及pEGFP-Nl质粒利用PEI转染MCF-7细胞，并通过G418筛选得到稳定转染细胞系。通过Western blot检测转染前后细胞DEC1、CyclinD1蛋白表达水平；MTT法检测转染前后MCF-7细胞增殖的变化。结果：成功构建DEC1真核表达载体pEGFP-Nl-DEC1；与pEGFP-Nl组和空白对照组相比，pEGFP-Nl-DEC1组DEC1表达明显增高（P＜0．05）；cyclin D1的表达明显降低（P＜0．05）；pEGFP-Nl-DEC1组细胞增殖能力明显受到抑制。结论：过表达DEC1可抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖， DEC1可能通过下调cyclin D1基因的表达从而阻止细胞周期及TGF-β信号通路而发挥作用。